多肽修饰——胆固醇（chol）

胆固醇分子上通常用于连接的基团是3-位的羟基，

 连接键的类型：

• 通过胆固醇氯甲酸酯连接会形成氨基甲酸酯键：胆固醇的羟基与光气或其衍生物反应生成。氯甲酸酯基团非常活泼，很容易与N端的氨基反应形成氨基甲酸酯键。。
• 通过胆固醇半琥珀酸酯连接会形成酰胺键：胆固醇的羟基与琥珀酸酐反应，生成一端是胆固醇酯、另一端是游离羧基的化合物。这个游离羧基可以通过碳二亚胺类缩合剂（如EDC）活化，然后与N端的氨基反应形成酰胺键。
• 这两种键在生理条件下都比较稳定。

多肽修饰——胆固醇（chol），能够：

• 增强细胞膜穿透性： 胆固醇具有亲脂性，能够插入细胞膜。将其连接到多肽上（形成所谓的“胆固醇化多肽”或“脂肽”），可以显著提高多肽穿过细胞膜进入细胞的能力，这对于需要作用于细胞内的多肽药物（如抗癌肽、抗病毒肽）至关重要。

• 延长血液循环半衰期： 胆固醇化可以使多肽更容易与血液中的脂蛋白（如HDL、LDL）结合，从而减少肾脏清除，延长其在体内的作用时间。

• 改善药代动力学性质： 综合提升吸收、分布和稳定性。

• 靶向递送： 利用脂蛋白受体介导的胞吞作用，可以将胆固醇化多肽靶向递送到表达特定脂蛋白受体的细胞或组织。

连接位点选择N端：

• 易于定位和修饰： N端在多肽中是独特的（只有一个），不像侧链基团（如Lys的ε-氨基）可能有多个且性质类似，修饰时选择性较差。这简化了合成和纯化过程。

• 空间位阻相对较小： 相对于侧链基团，N端氨基通常位于多肽链的末端，空间位阻相对较小，更容易被修饰试剂接近。

• 避免干扰功能性侧链： 如果多肽的关键功能依赖于特定的侧链（如活性位点的His、Ser、Asp等），将胆固醇连在远离这些位点的N端可以减少对其功能的干扰。

其他连接位点：

• C端： 也可以通过类似原理连接到C端的羧基上（通常需要活化羧基，如形成活性酯）。

• 侧链： 可以连接到含有反应性侧链基团的氨基酸上，最常见的是赖氨酸的ε-氨基。这通常需要保护N端α-氨基，或者在合成时选择性地修饰特定位置的Lys。连接方式与N端类似（活化胆固醇后形成氨基甲酸酯键或酰胺键）。

• 选择N端、C端还是侧链取决于具体的多肽序列、功能需求以及合成策略。