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BRD4缺失通过GRP78灭活内质网应激，延缓脱氢表雄酮诱导的卵巢颗粒细胞凋亡

news 来源：原创 2025/5/23 5:11:22

近日，一项由宁波大学医学院附属妇女儿童医院与同济大学附属东方医院妇产科合作的研究，揭示了BRD4（Bromodomain-containing protein 4）在PCOS中的重要作用，以及其与内质网应激（ERS）的复杂关系。值得一提的是，这项研究还巧妙地运用了AbMole公司提供的多种科研产品，为实验的成功奠定了坚实基础。

研究背景：PCOS与BRD4的不解之缘

PCOS是一种常见的妇科疾病，全球约有33%的育龄女性受其困扰。该病以高雄激素血症、无排卵、多囊卵巢形态以及胰岛素抵抗等代谢功能障碍为特征，不仅影响女性的生育能力，还可能增加患糖尿病、肥胖、血脂异常和心血管疾病的风险。近年来，随着对BRD4等BET（Bromodomain and Extra-Terminal）蛋白家族成员研究的深入，科学家们发现BRD4在多种细胞事件中扮演着关键角色，如细胞生长、细胞周期、炎症以及癌症发展等。特别是在PCOS中，BRD4被证实能促进卵巢纤维化。然而，BRD4在PCOS中的具体作用机制仍是个谜。

研究方法：巧妙运用AbMole产品助力科学探索

为了揭示BRD4在PCOS中的作用机制，研究团队设计了一系列精妙的实验。他们不仅采用了CCK-8法、EDU染色和TUNEL染色等经典细胞生物学技术来检测细胞增殖和凋亡情况，还利用Western blot技术分析了BRD4、凋亡相关蛋白和内质网应激相关蛋白的表达水平。尤为值得一提的是，研究团队还巧妙地运用了AbMole公司提供的多种高质量科研产品，为实验的顺利进行提供了有力保障。

在实验中，研究团队使用了AbMole的BRD4抑制剂JQ-1、ERS激活剂衣霉素（TM）以及脱氢表雄酮（DHEA）。这些产品均经过严格的质量控制，确保了实验结果的准确性和可靠性。例如，JQ-1作为一种选择性BRD4抑制剂，能够有效地阻断BRD4与染色质的结合，从而研究BRD4在细胞功能中的作用；TM则作为一种ERS激活剂，能够帮助研究团队更好地了解ERS在PCOS中的作用机制；而DHEA作为PCOS模型中常用的诱导剂，能够模拟PCOS患者的激素环境，为研究提供稳定的模型系统。

(+)-JQ1 | 1268524-70-4 | AbMole | JQ1

实验过程：步步为营探索BRD4与ERS的关联

在实验过程中，研究团队首先利用DHEA诱导KGN细胞（一种保留卵巢颗粒细胞正常生理特征的人类颗粒细胞瘤细胞系）建立PCOS体外模型，并通过CCK-8法筛选出最佳的DHEA诱导浓度。结果发现，40μmol/l的DHEA对KGN细胞的存活率有显著的抑制作用，因此被选为后续实验的诱导浓度。

随后，研究团队通过Western blot技术检测了BRD4及ERS相关蛋白的表达水平。结果显示，DHEA诱导后BRD4表达显著上调，同时ERS相关蛋白GRP78、p-IREα/IREα、p-eIF2α/eIF2α和CHOP的表达也显著增加。这表明DHEA诱导能够激活ERS并上调BRD4的表达。

为了进一步研究BRD4在PCOS中的作用机制，研究团队利用siRNA技术沉默了KGN细胞中的BRD4表达，并使用JQ-1进一步验证BRD4缺失对细胞功能的影响。通过CCK-8法和EDU染色技术，他们发现BRD4缺失或JQ-1处理能够显著提高DHEA诱导下KGN细胞的存活率和增殖能力。同时，TUNEL染色和Western blot技术也证实BRD4缺失能够显著降低细胞的凋亡率并减少凋亡相关蛋白Bax和Cleaved caspase3的表达。

实验结果分析：BRD4通过GRP78调控ERS影响细胞命运

在研究过程中，研究团队还意外发现BRD4可能与GRP78存在相互作用。通过HDOCK服务器预测和Co-IP实验验证，他们证实了BRD4确实能够与GRP78结合。GRP78作为ERS的关键调控因子，在ERS信号通路中发挥着重要作用。因此，研究团队进一步探讨了BRD4与GRP78的相互作用在ERS调控中的作用。

实验结果显示，BRD4缺失或JQ-1处理能够显著降低DHEA诱导下KGN细胞中GRP78、p-IREα/IREα、p-eIF2α/eIF2α和CHOP的表达水平，表明BRD4缺失能够灭活ERS。此外，当研究团队通过过表达GRP78或使用ERS激活剂TM部分恢复ERS时，BRD4缺失对细胞存活率、增殖能力和凋亡率的抑制作用被部分抵消。这些结果表明BRD4缺失可能通过灭活GRP78介导的ERS来影响PCOS中卵巢颗粒细胞的命运。

研究意义：为PCOS研究开辟新视角

这项研究不仅揭示了BRD4在PCOS中的重要作用及其与ERS的复杂关系，还为PCOS的研究和治疗提供了新的视角。通过深入了解BRD4和GRP78在ERS调控中的作用机制，研究团队为开发针对PCOS的新型干预策略提供了理论基础。例如，未来可以探索针对BRD4或GRP78的小分子抑制剂作为PCOS的潜在治疗手段。此外，该研究还强调了内质网应激在PCOS发病机制中的重要性，为深入理解PCOS的病理生理过程提供了新的线索。