流式上机操作步骤

上机参数设置：

（1）主界面分五个模块：1文件、2参数、3设置、4记录、5画图

（2）文件：

文件夹：一般就是某个人名字；

实验：这次做的CD4区分T/B cell，上次做的CD8区分T/B cell；

处理：用CD4染色建立一个specimen，用对照建立一个specimen；

重复：用CD4染色的3组细胞，建立3个tube

（3）设置：

选中Tube，可以更改名称

（4）参数：

Parameters：通道需要保留FSC、SSC和染色的通道，如果染了FITC、PE就保留两个，其余删掉；

（5）画图：

散点图：FSC-SSC、FITC-PI

峰图：测量FITC、PI荧光强度

P1门：只会记录门里的细胞

（6）记录：

调节电压：细胞主群位于45度斜线上

Conpensation：消除不同荧光染料之间的光谱重叠，如果FITC（绿色荧光）遗漏到PI（红色荧光）通道，需要增加PI红色通道对绿色荧光的补偿。这样做是为了从红色通道的信号中扣除绿色荧光的干扰，从而获得更纯净的红色荧光信号

Aquire：实时数据

Record：记录数据