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CD47是一种广泛表达的跨膜蛋白，属于免疫球蛋白超家族，在多种细胞类型（包括肿瘤细胞、红细胞和免疫细胞）表面存在。其在癌症生物学中的核心意义是作为“不要吃我”（Don't Eat Me）信号受体。
作用机制：CD47与巨噬细胞表面的信号调节蛋白α（SIRPα）结合，触发抑制性信号通路，阻止巨噬细胞对靶细胞的吞噬。这类似于一个“检查点”，帮助健康细胞避免被误噬，但肿瘤细胞高表达CD47以逃避免疫清除（REFERENCES中引用Feng et al., 2019和Liu et al., 2023）。
在癌症免疫治疗中的意义：CD47阻断是新兴的免疫治疗策略。通过抗体（如BioXcell的Anti-CD47）阻断CD47-SIRPα相互作用，可以“解除刹车”，增强巨噬细胞介导的肿瘤细胞吞噬。
文献案例：
文章主题 | A protocol for high-throughput screening for small chemicals promoting macrophagemediated tumor cell phagocytosis in mice |
目标 | 文章的实验思路框架围绕“高通量筛选促进巨噬细胞介导的肿瘤细胞吞噬的小分子”协议展开。包括装备肿瘤细胞、制备巨噬细胞、优化共培养条件、执行高通量筛选和数据分析 |
实验模型 | 肿瘤细胞：工程化表达eGFP-Luc的人类癌细胞系（如SW480） 巨噬细胞：原代小鼠骨髓来源巨噬细胞（BMDMs），作为吞噬效应细胞。 |
实验workflow
阶段1 | 装备肿瘤细胞表达eGFP和荧光素酶，使吞噬后存活细胞可通过发光信号量化 |
阶段2 | 从小鼠骨髓制备原代巨噬细胞，作为吞噬效应细胞用于共培养 |
阶段3 | 优化巨噬细胞-肿瘤细胞比例和抗体浓度，使基础吞噬率在40-60%，便于筛选 |
阶段4 | 通过D-luciferin发光信号量化吞噬率，替代传统流式或显微镜方法 |
阶段5 | 在96孔板中测试小分子化合物，识别吞噬增强剂或抑制剂 |
阶段6 | 验证BMDM纯度（F4/80标记）和eGFP-Luc细胞感染效率 |
阶段7 | 计算吞噬率和药物敏感性分数，识别有效化合物 |
抗体名称 | 来源公司 | 标识符 (Identifier) | 目的 | 用途 |
|---|---|---|---|---|
Anti-CD47 antibody | Bio X Cell | BE0019-1 | 阻断吞噬检查点（CD47信号通路），解除肿瘤细胞对巨噬细胞的“不要吃我”抑制，从而增强吞噬活性。 | 在共培养优化和HTS中添加，用于诱导基础吞噬（如4000 ng/mL浓度），便于筛选小分子增强剂。 |
BioXcell的Anti-CD47抗体（BE0019-1）直接靶向CD47，在共培养系统中用于诱导吞噬。 但是文章中说明CD47阻断单用常不足以有效抑制肿瘤，因此文章旨在通过HTS寻找小分子增强剂，提升抗体疗效。